ยีนต้านทานยาคาร์บาเพเนม (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
ชื่อผลิตภัณฑ์
ชุดตรวจหาพันธุกรรมต้านทานยาคาร์บาเพเนม HWTS-OT045 (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (วิธี PCR เรืองแสง)
ระบาดวิทยา
ยาปฏิชีวนะกลุ่มคาร์บาเพเนมเป็นยาปฏิชีวนะกลุ่มเบต้า-แลคแทมชนิดพิเศษที่มีฤทธิ์ต้านแบคทีเรียในวงกว้างที่สุดและมีฤทธิ์แรงที่สุด เนื่องจากมีความเสถียรต่อเอนไซม์เบต้า-แลคตาเมสและมีความเป็นพิษต่ำ จึงกลายเป็นยาต้านแบคทีเรียที่สำคัญที่สุดชนิดหนึ่งสำหรับการรักษาการติดเชื้อแบคทีเรียรุนแรง คาร์บาเพเนมมีความเสถียรสูงต่อเอนไซม์เบต้า-แลคตาเมสชนิดออกฤทธิ์กว้าง (ESBLs) ที่ถ่ายทอดผ่านพลาสมิด โครโมโซม และเอนไซม์เซฟาโลสปอริเนส (AmpC) ที่ถ่ายทอดผ่านพลาสมิด
ช่อง
| พีซีอาร์-มิกซ์ 1 | พีซีอาร์-มิกซ์ 2 | |
| ครอบครัว | อิมพีแดนซ์ | วีเอ็ม |
| วิค/เฮ็กซ์ | การควบคุมภายใน | การควบคุมภายใน |
| ซีวาย5 | เอ็นดีเอ็ม | เคพีซี |
| ร็อกซ์ | OXA48
| OXA23 |
พารามิเตอร์ทางเทคนิค
| พื้นที่จัดเก็บ | ≤-18℃ |
| อายุการเก็บรักษา | 12 เดือน |
| ประเภทตัวอย่าง | เสมหะ, โคโลนีบริสุทธิ์, การเก็บตัวอย่างจากทวารหนัก |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5.0% |
| ระดับ LoD | 103ซีเอฟโอ/มล. |
| ความจำเพาะ | ก) ชุดตรวจนี้สามารถตรวจจับตัวอย่างอ้างอิงเชิงลบมาตรฐานของบริษัทได้ และผลลัพธ์เป็นไปตามข้อกำหนดของตัวอย่างอ้างอิงที่เกี่ยวข้อง b) ผลการทดสอบปฏิกิริยาข้ามสายพันธุ์แสดงให้เห็นว่าชุดทดสอบนี้ไม่มีปฏิกิริยาข้ามสายพันธุ์กับเชื้อก่อโรคระบบทางเดินหายใจอื่นๆ เช่น Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, Respiratory adenovirus, Enterococcus หรือตัวอย่างที่มีจีนต้านทานยาอื่นๆ เช่น CTX, mecA, SME, SHV, TEM เป็นต้น ค) การป้องกันการรบกวน: สารมิวซิน, มินโนไซคลิน, เจนทาไมซิน, คลินดาไมซิน, อิมิเพเนม, เซโฟเพอราโซน, เมโรเพเนม, ซิโปรฟลอกซาซินไฮโดรคลอไรด์, เลโวฟลอกซาซิน, กรดคลาวูลานิก และร็อกซิโทรไมซิน ถูกเลือกมาทดสอบการรบกวน และผลการทดสอบแสดงให้เห็นว่าสารรบกวนดังกล่าวไม่มีปฏิกิริยาการรบกวนต่อการตรวจหายีนต้านทานคาร์บาเพเนม KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM และ IMP |
| เครื่องมือที่เกี่ยวข้อง | ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ Applied Biosystems 7500 ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ QuantStudio®5 ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ SLAN-96P (บริษัท หงซือ เมดิคอล เทคโนโลยี จำกัด) ระบบ LightCycler®480 Real-Time PCR ระบบตรวจจับ PCR แบบเรียลไทม์ LineGene 9600 Plus (เอฟคิวดี-96เอ,หางโจวเทคโนโลยีชีวภาพ) เครื่องวิเคราะห์อุณหภูมิแบบเรียลไทม์เชิงปริมาณ MA-6000 (บริษัท ซูโจว โมลาร์เรย์ จำกัด) ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ BioRad CFX96 ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ BioRad CFX Opus 96 |
ขั้นตอนการทำงาน
ตัวเลือกที่ 1.
น้ำยาที่แนะนำสำหรับการสกัด: ชุดสกัด DNA/RNA ทั่วไปของ Macro & Micro-Test (HWTS-301)9-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (ซึ่งสามารถใช้ร่วมกับเครื่องสกัดกรดนิวคลีอิกอัตโนมัติ Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) จากบริษัท Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd. เติมน้ำเกลือปกติ 200 μL ลงในตะกอนทัลลัส ขั้นตอนต่อไปควรปฏิบัติตามคำแนะนำในการสกัด และปริมาตรการชะล้างที่แนะนำคือ100 ไมโครลิตร
ตัวเลือกที่ 2.
แนะนำให้ใช้สารสกัด: สารสกัดหรือน้ำยาทำให้บริสุทธิ์กรดนิวคลีอิก (YDP302) จากบริษัท Tiangen Biotech (Beijing) จำกัด ควรเริ่มการสกัดอย่างเคร่งครัดตามขั้นตอนที่ 2 ของคำแนะนำการใช้งาน (เติมบัฟเฟอร์ GA 200 μL ลงในตะกอนของทัลลัส และเขย่าจนกว่าทัลลัสจะกระจายตัวอย่างสมบูรณ์) ใช้น้ำปราศจาก RNase/DNase สำหรับการชะล้าง และปริมาตรการชะล้างที่แนะนำคือ 100 μL
ตัวเลือกที่ 3
น้ำยาสกัดที่แนะนำ: น้ำยาปลดปล่อยตัวอย่าง Macro & Micro-Test ตัวอย่างเสมหะต้องล้างโดยเติมน้ำเกลือปกติ 1 มิลลิลิตรลงในตะกอนทัลลัสที่ผ่านการบำบัดแล้ว ปั่นเหวี่ยงที่ 13000 รอบ/นาที เป็นเวลา 5 นาที และทิ้งส่วนของเหลวใส (เก็บส่วนของเหลวใสไว้ 10-20 ไมโครลิตร) สำหรับโคโลนีบริสุทธิ์และตัวอย่างจากทวารหนัก ให้เติมน้ำยาปลดปล่อยตัวอย่าง 50 ไมโครลิตรลงในตะกอนทัลลัสที่ผ่านการบำบัดแล้วโดยตรง และขั้นตอนต่อไปควรดำเนินการสกัดตามคำแนะนำในการใช้งาน







