ยีน A/B ของสารพิษ Clostridium difficile (C.diff)
ชื่อสินค้า
ชุดตรวจหากรดนิวคลีอิก HWTS-OT031A สำหรับยีน Clostridium difficile toxin A/B (C.diff) (Fluorescence PCR)
ใบรับรอง
CE
ระบาดวิทยา
เชื้อคลอสตริเดียม ดิฟฟิซิล (CD) เป็นเชื้อคลอสตริเดียม ดิฟฟิซิลแกรมบวกชนิดไม่ใช้ออกซิเจน สปอร์ก่อโรค เป็นหนึ่งในเชื้อก่อโรคหลักที่ทำให้เกิดการติดเชื้อในลำไส้ในโรงพยาบาล ในทางคลินิก ประมาณ 15%-25% ของอาการท้องเสียที่เกี่ยวข้องกับยาต้านจุลชีพ 50%-75% ของอาการลำไส้ใหญ่อักเสบที่เกี่ยวข้องกับยาต้านจุลชีพ และ 95%-100% ของอาการลำไส้อักเสบจากเยื่อเทียม เกิดจากการติดเชื้อคลอสตริเดียม ดิฟฟิซิล (CDI) เชื้อคลอสตริเดียม ดิฟฟิซิลเป็นเชื้อก่อโรคแบบมีเงื่อนไข ซึ่งรวมถึงสายพันธุ์ที่ก่อให้เกิดพิษและสายพันธุ์ที่ไม่ก่อให้เกิดพิษ
ช่อง
ครอบครัว | tcdAยีน |
ร็อกซ์ | ทีซีดีบียีน |
วิค/เฮกซ์ | การควบคุมภายใน |
พารามิเตอร์ทางเทคนิค
พื้นที่จัดเก็บ | ≤-18℃ |
อายุการเก็บรักษา | 12 เดือน |
ชนิดของตัวอย่าง | อุจจาระ |
Tt | ≤38 |
CV | ≤5.0% |
ล็อด | 200CFU/มล. |
ความเฉพาะเจาะจง | ใช้ชุดทดสอบนี้เพื่อตรวจหาเชื้อก่อโรคในลำไส้ชนิดอื่นๆ เช่น Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Shigella, Salmonella, Vibrio parahaemolyticus, Group B Streptococcus, Clostridium difficile non-pathogenic strains, Adenovirus, rotavirus, norovirus, influenza virus, influenza B virus และ DNA จีโนมของมนุษย์ โดยผลการทดสอบทั้งหมดเป็นลบ |
เครื่องมือที่ใช้ได้ | ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ Applied Biosystems 7500 ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ความเร็วสูง Applied Biosystems 7500 ควอนท์สตูดิโอ®ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ 5 ระบบ ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ SLAN-96P (บริษัท ฮงสือ เมดิคอล เทคโนโลยี จำกัด) ไลท์ไซเคิล®ระบบ 480 Real-Time PCR ระบบตรวจจับ PCR แบบเรียลไทม์ LineGene 9600 Plusเอฟคิวดี-96เอ-หางโจวเทคโนโลยีไบโอเออร์) เครื่องวิเคราะห์ความร้อนเชิงปริมาณแบบเรียลไทม์ MA-6000 (บริษัท ซูโจว โมลาร์เรย์ จำกัด) ระบบ BioRad CFX96 Real-Time PCR ระบบ BioRad CFX Opus 96 Real-Time PCR |
กระบวนการทำงาน
ตัวเลือกที่ 1.
เติมบัฟเฟอร์ไลโซไซม์ 180μL ลงในตะกอน (เจือจางไลโซไซม์เป็น 20 มก./มล. ด้วยสารเจือจางไลโซไซม์) ปิเปตเพื่อผสมให้เข้ากัน แล้วประมวลผลที่อุณหภูมิ 37°C นานกว่า 30 นาที นำหลอดปั่นเหวี่ยงที่ปราศจาก RNase/DNase ปริมาตร 1.5 มล. แล้วเติม180μL ของการควบคุมเชิงบวกและการควบคุมเชิงลบตามลำดับ เพิ่ม10μL ของตัวควบคุมภายในสำหรับตัวอย่างที่จะทดสอบ ตัวควบคุมบวก และตัวควบคุมลบตามลำดับ และใช้สารสกัดหรือสารทำให้บริสุทธิ์กรดนิวคลีอิก (YDP302) ของบริษัท Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. สำหรับการสกัดดีเอ็นเอตัวอย่างในลำดับถัดไป และโปรดปฏิบัติตามคำแนะนำการใช้งานอย่างเคร่งครัดสำหรับขั้นตอนเฉพาะ ใช้ DNase/RNase free H2O สำหรับการชะ และปริมาตรการชะที่แนะนำคือ 100μL
ตัวเลือกที่ 2.
นำหลอดปั่นเหวี่ยง RNase/DNase-free ขนาด 1.5 มล. มาเติมสารละลายควบคุมบวกและควบคุมลบ 200 μL ตามลำดับ เติม10μL ของชุดควบคุมภายในสำหรับตัวอย่างที่จะทดสอบ ชุดควบคุมบวก และชุดควบคุมลบ ตามลำดับ และใช้ชุดทดสอบ Macro & Micro-Test Viral DNA/RNA Kit (HWTS-3004-32, HWTS-3004-48, HWTS-3004-96) และเครื่องสกัดกรดนิวคลีอิกอัตโนมัติ Macro & Micro-Test (HWTS-3006) การสกัดควรปฏิบัติตามคำแนะนำการใช้งานอย่างเคร่งครัด และปริมาตรการชะล้างที่แนะนำคือ 80 μL