ยีน A/B ของสารพิษ Clostridium difficile (C.diff)
ชื่อผลิตภัณฑ์
HWTS-OT031A ชุดตรวจจับกรดนิวคลีอิกสำหรับยีน A/B ของสารพิษจากเชื้อ Clostridium difficile (C.diff) (PCR เรืองแสง)
ใบรับรอง
CE
ระบาดวิทยา
Clostridium difficile (CD) ซึ่งเป็นเชื้อ Clostridium difficile แบบไม่ใช้ออกซิเจนแบบแกรมบวกเป็นหนึ่งในเชื้อโรคหลักที่ทำให้เกิดการติดเชื้อในลำไส้ในโรงพยาบาลในทางคลินิก ประมาณ 15%~25% ของอาการท้องร่วงที่เกี่ยวข้องกับยาต้านจุลชีพ, 50%~75% ของอาการลำไส้ใหญ่บวมที่เกี่ยวข้องกับยาต้านจุลชีพ และ 95%~100% ของลำไส้อักเสบปลอมมีสาเหตุมาจากการติดเชื้อ Clostridium difficile (CDI)Clostridium difficile เป็นเชื้อก่อโรคที่มีเงื่อนไข รวมถึงสายพันธุ์ที่เป็นพิษและสายพันธุ์ที่ไม่เป็นพิษ
ช่อง
แฟม | tcdAยีน |
ร็อกซ์ | ทีซีดีบียีน |
วิค/ฐานสิบหก | การควบคุมภายใน |
พารามิเตอร์ทางเทคนิค
พื้นที่จัดเก็บ | ≤-18 ℃ |
อายุการเก็บรักษา | 12 เดือน |
ประเภทชิ้นงาน | อุจจาระ |
Tt | ≤38 |
CV | ≤5.0% |
LoD | 200CFU/มล |
ความจำเพาะ | ใช้ชุดอุปกรณ์นี้ตรวจหาเชื้อก่อโรคในลำไส้อื่นๆ เช่น Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Shigella, Salmonella, Vibrio parahaemolyticus, Group B Streptococcus, Clostridium difficile สายพันธุ์ไม่ก่อโรค, Adenovirus, rotavirus, norovirus, ไวรัสไข้หวัดใหญ่ A, ไวรัสไข้หวัดใหญ่ B และจีโนมของมนุษย์ DNA ผลออกมาเป็นลบหมดเลย |
เครื่องมือที่ใช้บังคับ | Applied Biosystems 7500 ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ Applied Biosystems 7500 ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ที่รวดเร็ว ควอนท์สตูดิโอ®5 ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ SLAN-96P (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) ไลท์ไซเคิล®480 ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ LineGene 9600 Plus ระบบตรวจจับ PCR แบบเรียลไทม์ (FQD-96A-หางโจวเทคโนโลยีไบโอเออร์) MA-6000 เครื่องหมุนเวียนความร้อนเชิงปริมาณแบบเรียลไทม์ (Suzhou Molarray Co., Ltd.) ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ BioRad CFX96 BioRad CFX Opus 96 ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ |
ขั้นตอนการทำงาน
ตัวเลือกที่ 1.
เติมบัฟเฟอร์ไลโซไซม์ 180μL ลงในตะกอน (เจือจางไลโซไซม์เป็น 20 มก./มล. ด้วยสารเจือจางไลโซไซม์) ปิเปตเพื่อผสมให้เข้ากัน และปั่นที่อุณหภูมิ 37°C เป็นเวลานานกว่า 30 นาที ใช้หลอดหมุนเหวี่ยงที่ปราศจาก RNase/DNase 1.5 มล. และเพิ่ม180μLของการควบคุมเชิงบวกและการควบคุมเชิงลบตามลำดับเพิ่ม10μL ของการควบคุมภายในไปยังตัวอย่างที่จะทดสอบ การควบคุมเชิงบวก และการควบคุมเชิงลบตามลำดับ และใช้การสกัดกรดนิวคลีอิกหรือรีเอเจนต์การทำให้บริสุทธิ์ (YDP302) โดย Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. สำหรับการสกัด DNA ตัวอย่างในภายหลัง และ โปรดปฏิบัติตามคำแนะนำการใช้งานตามขั้นตอนเฉพาะอย่างเคร่งครัดใช้ DNase/RNase ฟรี H2O สำหรับการชะล้าง และปริมาตรการชะล้างที่แนะนำคือ 100ไมโครลิตร
ตัวเลือกที่ 2
ใช้หลอดสำหรับการหมุนเหวี่ยงแบบไม่มี RNase/DNase 1.5 มล. และเพิ่ม 200μL ของกลุ่มควบคุมเชิงบวกและกลุ่มควบคุมเชิงลบตามลำดับเพิ่ม10μL ของการควบคุมภายในไปยังตัวอย่างที่จะทดสอบ การควบคุมเชิงบวก และการควบคุมเชิงลบตามลำดับ และใช้ชุด Macro & Micro-Test Viral DNA/RNA (HWTS-3004-32, HWTS-3004-48, HWTS-3004- 96) และเครื่องสกัดกรดนิวคลีอิกอัตโนมัติแบบมาโครและไมโครเทสต์ (HWTS-3006)การสกัดควรดำเนินการอย่างเคร่งครัดตามคำแนะนำในการใช้งาน และปริมาตรการชะล้างที่แนะนำคือ 80μL