ยีนสารพิษ A/B ของ Clostridium difficile (C.diff)
ชื่อผลิตภัณฑ์
ชุดตรวจหาดีเอ็นเอ HWTS-OT031A สำหรับยีนสารพิษ A/B ของ Clostridium difficile (C.diff) (PCR แบบเรืองแสง)
ใบรับรอง
CE
ระบาดวิทยา
คลอสทริเดียม ดิฟฟิซิล (CD) เป็นแบคทีเรียแกรมบวกแบบไม่ใช้ออกซิเจนที่สร้างสปอร์ได้ และเป็นหนึ่งในเชื้อก่อโรคหลักที่ทำให้เกิดการติดเชื้อในลำไส้ในโรงพยาบาล ในทางคลินิก ประมาณ 15%-25% ของอาการท้องเสียที่เกิดจากยาปฏิชีวนะ 50%-75% ของลำไส้ใหญ่อักเสบที่เกิดจากยาปฏิชีวนะ และ 95%-100% ของลำไส้อักเสบชนิดเยื่อบุเทียม เกิดจากการติดเชื้อคลอสทริเดียม ดิฟฟิซิล (CDI) คลอสทริเดียม ดิฟฟิซิลเป็นเชื้อก่อโรคแบบมีเงื่อนไข ซึ่งรวมถึงสายพันธุ์ที่สร้างสารพิษและสายพันธุ์ที่ไม่สร้างสารพิษ
ช่อง
| ครอบครัว | tcdAยีน |
| ร็อกซ์ | tcdBยีน |
| วิค/เฮ็กซ์ | การควบคุมภายใน |
พารามิเตอร์ทางเทคนิค
| พื้นที่จัดเก็บ | ≤-18℃ |
| อายุการเก็บรักษา | 12 เดือน |
| ประเภทตัวอย่าง | อุจจาระ |
| Tt | ≤38 |
| CV | ≤5.0% |
| ระดับ LoD | 200 CFU/มล. |
| ความจำเพาะ | ใช้ชุดตรวจนี้เพื่อตรวจหาเชื้อก่อโรคในลำไส้อื่นๆ เช่น Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Shigella, Salmonella, Vibrio parahaemolyticus, Group B Streptococcus, Clostridium difficile สายพันธุ์ที่ไม่ก่อโรค, Adenovirus, rotavirus, norovirus, ไวรัสไข้หวัดใหญ่ A, ไวรัสไข้หวัดใหญ่ B และดีเอ็นเอจีโนมของมนุษย์ ผลลัพธ์ทั้งหมดเป็นลบ |
| เครื่องมือที่เกี่ยวข้อง | ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ Applied Biosystems 7500 ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ความเร็วสูง Applied Biosystems 7500 ควอนต์สตูดิโอ®5 ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ SLAN-96P (บริษัท หงซือ เมดิคอล เทคโนโลยี จำกัด) ไลท์ไซเคิล®ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ 480 ระบบตรวจจับ PCR แบบเรียลไทม์ LineGene 9600 Plus (เอฟคิวดี-96เอ，หางโจวเทคโนโลยีชีวภาพ) เครื่องวิเคราะห์อุณหภูมิแบบเรียลไทม์เชิงปริมาณ MA-6000 (บริษัท ซูโจว โมลาร์เรย์ จำกัด) ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ BioRad CFX96 ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ BioRad CFX Opus 96 |
ขั้นตอนการทำงาน
ตัวเลือกที่ 1.
เติมสารละลายบัฟเฟอร์ไลโซไซม์ 180 ไมโครลิตรลงในตะกอน (เจือจางไลโซไซม์ให้มีความเข้มข้น 20 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร ด้วยสารละลายเจือจางไลโซไซม์) ใช้ปิเปตผสมให้เข้ากัน และทำการแยกตะกอนที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส นานกว่า 30 นาที จากนั้นใช้หลอดเหวี่ยงแยกสารที่ปราศจาก RNase/DNase ขนาด 1.5 มิลลิลิตร เติมสารละลายบัฟเฟอร์ไลโซไซม์ลงไป180 μL ของตัวควบคุมเชิงบวกและตัวควบคุมเชิงลบตามลำดับ เติม10เติมสารควบคุมภายในปริมาณ μL ลงในตัวอย่างที่จะทดสอบ สารควบคุมเชิงบวก และสารควบคุมเชิงลบตามลำดับ และใช้สารสกัดหรือน้ำยาทำให้บริสุทธิ์กรดนิวคลีอิก (YDP302) จากบริษัท Tiangen Biotech (Beijing) จำกัด สำหรับการสกัด DNA จากตัวอย่างในขั้นตอนต่อไป โปรดปฏิบัติตามคำแนะนำในการใช้งานอย่างเคร่งครัดในแต่ละขั้นตอน ใช้ H ที่ปราศจาก DNase/RNase2ใช้ O สำหรับการชะล้าง และปริมาตรการชะล้างที่แนะนำคือ 100 μL
ตัวเลือกที่ 2.
ใช้หลอดทดลองแบบปราศจาก RNase/DNase ขนาด 1.5 มล. แล้วเติมสารควบคุมเชิงบวกและสารควบคุมเชิงลบอย่างละ 200 ไมโครลิตรตามลำดับ จากนั้นเติม...10เติมสารควบคุมภายในปริมาณ μL ลงในตัวอย่างที่จะทดสอบ สารควบคุมเชิงบวก และสารควบคุมเชิงลบตามลำดับ โดยใช้ชุดตรวจ Macro & Micro-Test Viral DNA/RNA Kit (HWTS-3004-32, HWTS-3004-48, HWTS-3004-96) และเครื่องสกัดกรดนิวคลีอิกอัตโนมัติ Macro & Micro-Test (HWTS-3006) การสกัดควรดำเนินการอย่างเคร่งครัดตามคำแนะนำการใช้งาน และปริมาตรการชะล้างที่แนะนำคือ 80 μL
