15 ชนิดของยีน mRNA E6/E7 ของไวรัส Human Papillomavirus ที่มีความเสี่ยงสูง
ชื่อผลิตภัณฑ์
ชุดตรวจหา mRNA ของยีน E6/E7 ของไวรัส Human Papillomavirus ชนิดความเสี่ยงสูง HWTS-CC005A-15 (วิธี PCR เรืองแสง)
ระบาดวิทยา
มะเร็งปากมดลูกเป็นมะเร็งชนิดหนึ่งที่พบได้บ่อยในผู้หญิงทั่วโลก และการเกิดมะเร็งชนิดนี้มีความเกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดกับไวรัสฮิวแมนแพปิโลมา (HPV) แต่มีเพียงส่วนน้อยของการติดเชื้อ HPV เท่านั้นที่จะพัฒนาไปเป็นมะเร็งได้ ไวรัส HPV ชนิดความเสี่ยงสูงจะติดเชื้อในเซลล์เยื่อบุผิวของปากมดลูกและสร้างโปรตีนก่อมะเร็งสองชนิด ได้แก่ E6 และ E7 โปรตีนเหล่านี้สามารถส่งผลกระทบต่อโปรตีนในเซลล์หลายชนิด (เช่น โปรตีนยับยั้งเนื้องอก pRB และ p53) ทำให้วงจรเซลล์ยาวนานขึ้น ส่งผลต่อการสังเคราะห์ DNA และความเสถียรของจีโนม และรบกวนการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันต่อไวรัสและเนื้องอก
ช่อง
| ช่อง | ส่วนประกอบ | ทดสอบจีโนไทป์ |
| ครอบครัว | บัฟเฟอร์ปฏิกิริยา HPV 1 | ไวรัส HPV16、31、33、35、51、52、58 |
| วิค/เฮ็กซ์ | ยีน β-actin ของมนุษย์ | |
| ครอบครัว | บัฟเฟอร์ปฏิกิริยา HPV 2 | ไวรัส HPV 18, 39, 45, 53, 56, 59, 66, 68 |
| วิค/เฮ็กซ์ | ยีน INS ของมนุษย์ |
พารามิเตอร์ทางเทคนิค
| พื้นที่จัดเก็บ | ของเหลว: ≤-18℃ |
| อายุการเก็บรักษา | 9 เดือน |
| ประเภทตัวอย่าง | การเก็บตัวอย่างจากปากมดลูก |
| Ct | ≤38 |
| CV | <5.0% |
| ระดับ LoD | 500 สำเนา/มล. |
| เครื่องมือที่เกี่ยวข้อง | ระบบ Real-Time PCR Applied Biosystems 7500ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ความเร็วสูง Applied Biosystems 7500 ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ QuantStudio®5 ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ SLAN-96P ระบบ LightCycler®480 Real-Time PCR ระบบตรวจจับ PCR แบบเรียลไทม์ LineGene 9600 Plus เครื่องวิเคราะห์อุณหภูมิแบบเรียลไทม์เชิงปริมาณ MA-6000 ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ BioRad CFX96 ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ BioRad CFX Opus 96 |
ขั้นตอนการทำงาน
แนะนำให้ใช้น้ำยาสกัด: ชุดตรวจ DNA/RNA ไวรัส Macro & Micro-Test (HWTS-3020-50-HPV15) จากบริษัท Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd. ควรทำการสกัดอย่างเคร่งครัดตามคำแนะนำการใช้งาน ปริมาณน้ำยาที่แนะนำคือ 50 μL หากตัวอย่างไม่ถูกย่อยอย่างสมบูรณ์ ให้กลับไปที่ขั้นตอนที่ 4 เพื่อทำการย่อยใหม่ จากนั้นทำการทดสอบตามคำแนะนำการใช้งาน
แนะนำให้ใช้น้ำยาสกัด: ชุดสกัด RNA จากเนื้อเยื่อสัตว์บริสุทธิ์ RNAprep Pure Animal Tissue Total RNA Extraction Kit (DP431) ควรดำเนินการสกัดตามคำแนะนำการใช้งานอย่างเคร่งครัด (ในขั้นตอนที่ 5 ให้เพิ่มความเข้มข้นของสารละลาย DNaseI เป็นสองเท่า กล่าวคือ นำสารละลาย DNaseI ปราศจาก RNase (1500U) ปริมาณ 20 μL ใส่ลงในหลอดเหวี่ยงปราศจาก RNase ใหม่ เติมบัฟเฟอร์ RDD 60 μL แล้วผสมเบาๆ) ปริมาตรการชะล้างที่แนะนำคือ 60 μL หากตัวอย่างไม่ถูกย่อยอย่างสมบูรณ์ ให้กลับไปที่ขั้นตอนที่ 5 เพื่อย่อยใหม่ จากนั้นทดสอบตามคำแนะนำการใช้งาน
