เชื้อวัณโรคดื้อต่อกรดนิวคลีอิกและไรแฟมพิซิน
ชื่อสินค้า
ชุดตรวจหาเชื้อวัณโรคและกรดนิวคลีอิก HWTS-RT074B-Mycobacterium Tuberculosis (เส้นโค้งการหลอมละลาย)
ใบรับรอง
CE
ระบาดวิทยา
เชื้อไมโคแบคทีเรียม ทูเบอร์คูโลซิส หรือที่รู้จักกันในชื่อวัณโรค (Tubercle bacillus) เป็นเชื้อแบคทีเรียก่อโรคที่ทำให้เกิดวัณโรค ปัจจุบันยาต้านวัณโรคกลุ่มแรกที่นิยมใช้ ได้แก่ ไอโซไนอะซิด ไรแฟมพิซิน และเฮกแซมบูทอล เป็นต้น ยาต้านวัณโรคกลุ่มที่สอง ได้แก่ ฟลูออโรควิโนโลน อะมิคาซิน และกานามัยซิน เป็นต้น ยาที่พัฒนาขึ้นใหม่ ได้แก่ ไลนีโซลิด เบดาควิลีน และเดลามานี เป็นต้น อย่างไรก็ตาม เนื่องจากการใช้ยาต้านวัณโรคอย่างไม่ถูกต้องและลักษณะโครงสร้างผนังเซลล์ของเชื้อไมโคแบคทีเรียม ทูเบอร์คูโลซิส ทำให้เชื้อไมโคแบคทีเรียม ทูเบอร์คูโลซิสดื้อยา ซึ่งก่อให้เกิดความท้าทายอย่างมากต่อการป้องกันและรักษาวัณโรค
ไรแฟมพิซินถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในการรักษาผู้ป่วยวัณโรคปอดตั้งแต่ปลายทศวรรษ 1970 และให้ผลอย่างมีนัยสำคัญ ถือเป็นตัวเลือกแรกในการลดระยะเวลาการให้เคมีบำบัดของผู้ป่วยวัณโรคปอด การดื้อยาไรแฟมพิซินส่วนใหญ่เกิดจากการกลายพันธุ์ของยีน rpoB แม้ว่าจะมียาต้านวัณโรคใหม่ๆ ออกมาอย่างต่อเนื่อง และประสิทธิภาพทางคลินิกของผู้ป่วยวัณโรคปอดก็ดีขึ้นอย่างต่อเนื่องเช่นกัน แต่ยาต้านวัณโรคยังคงมีอยู่น้อย และปรากฏการณ์การใช้ยาอย่างไม่สมเหตุสมผลในทางคลินิกก็ค่อนข้างสูง เห็นได้ชัดว่าเชื้อไมโคแบคทีเรียม ทูเบอร์คูโลซิสในผู้ป่วยวัณโรคปอดไม่สามารถกำจัดได้หมดสิ้นในเวลาที่เหมาะสม ซึ่งในที่สุดจะนำไปสู่ระดับการดื้อยาที่แตกต่างกันในร่างกายของผู้ป่วย ทำให้โรคดำเนินไปนานขึ้น และเพิ่มความเสี่ยงต่อการเสียชีวิตของผู้ป่วย
ช่อง
ช่อง | ช่องสัญญาณและฟลูออโรโฟร์ | บัฟเฟอร์ปฏิกิริยา A | บัฟเฟอร์ปฏิกิริยา B | บัฟเฟอร์ปฏิกิริยา C |
ช่อง FAM | ผู้สื่อข่าว : FAM, Quencher : ไม่มี | รปป.507-514 | rpoB 513-520 | 38KD และ IS6110 |
ช่อง CY5 | ผู้สื่อข่าว: CY5, Quencher: ไม่มี | rpoB 520-527 | รพ.บ.527-533 | / |
ช่อง HEX (VIC) | ผู้สื่อข่าว: HEX (VIC), Quencher: ไม่มี | การควบคุมภายใน | การควบคุมภายใน | การควบคุมภายใน |
พารามิเตอร์ทางเทคนิค
พื้นที่จัดเก็บ | ≤-18℃ ในที่มืด |
อายุการเก็บรักษา | 12 เดือน |
ชนิดของตัวอย่าง | เสมหะ |
CV | ≤5.0% |
ล็อด | ไมโคแบคทีเรียม ทูเบอร์คูโลซิส 50 แบคทีเรีย/มล. ชนิดป่าที่ดื้อต่อริแฟมพิซิน: 2x103แบคทีเรีย/มล. กลายพันธุ์แบบโฮโมไซกัส: 2x103แบคทีเรีย/มล. |
ความเฉพาะเจาะจง | ตรวจหาเชื้อไมโคแบคทีเรียม ทูเบอร์คูโลซิสชนิดป่าและตำแหน่งกลายพันธุ์ของยีนที่ดื้อยาอื่นๆ เช่น katG 315G>C\A, InhA-15C> T ผลการทดสอบแสดงให้เห็นว่าไม่มีการดื้อยาต่อริแฟมพิซิน ซึ่งหมายความว่าไม่มีปฏิกิริยาไขว้กัน |
เครื่องมือที่ใช้ได้: | ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ SLAN-96P ระบบ BioRad CFX96 Real-Time PCR ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ LightCycler480® |
กระบวนการทำงาน
หากใช้ชุดทดสอบ Macro & Micro-Test General DNA/RNA Kit (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (ซึ่งสามารถใช้ร่วมกับเครื่องสกัดกรดนิวคลีอิกอัตโนมัติ Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) หรือคอลัมน์ Macro & Micro-Test Viral DNA/RNA (HWTS-3022-50) ของบริษัท Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd. สำหรับการสกัด ให้เติม 200μL ของ Positive Control, negative control และตัวอย่างเสมหะที่ผ่านการประมวลผลที่จะทดสอบตามลำดับ และเติม 10μL ของ internal control แยกกันใน Positive Control, negative control และตัวอย่างเสมหะที่ผ่านการประมวลผลที่จะทดสอบ และขั้นตอนถัดไปควรดำเนินการตามคำแนะนำในการสกัดอย่างเคร่งครัด ปริมาตรตัวอย่างที่สกัดได้คือ 200μL และปริมาตรการชะที่แนะนำคือ 100μL