เชื้อมัยโคแบคทีเรียม วัณโรค กรดนิวคลีอิกและการต้านทานไรแฟมพิซิน
ชื่อผลิตภัณฑ์
HWTS-RT074B-ชุดตรวจความต้านทานต่อเชื้อมัยโคแบคทีเรียม วัณโรค กรดนิวคลีอิกและไรแฟมพิซิน (เส้นโค้งการหลอมละลาย)
ใบรับรอง
CE
ระบาดวิทยา
Mycobacterium tuberculosis หรือเรียกสั้น ๆ ว่า Tubercle bacillus หรือ TB เป็นแบคทีเรียก่อโรคที่ทำให้เกิดวัณโรคปัจจุบันยาต้านวัณโรคบรรทัดแรกที่ใช้กันทั่วไป ได้แก่ isoniazid, rifampicin และ hexambutol เป็นต้น ยาต้านวัณโรคบรรทัดที่สอง ได้แก่ fluoroquinolones, amikacin และ kanamycin เป็นต้น ยาที่พัฒนาขึ้นใหม่ ได้แก่ linezolid, bedaquiline และ delamani เป็นต้น อย่างไรก็ตามเนื่องจากการใช้ยาต้านวัณโรคอย่างไม่ถูกต้องและลักษณะของโครงสร้างผนังเซลล์ของเชื้อมัยโคแบคทีเรียมวัณโรค เชื้อมัยโคแบคทีเรียมวัณโรคจึงพัฒนาความต้านทานยาต่อยาต้านวัณโรคซึ่งนำมาซึ่งความท้าทายร้ายแรงในการป้องกันและรักษาวัณโรค
Rifampicin มีการใช้กันอย่างแพร่หลายในการรักษาผู้ป่วยวัณโรคปอดตั้งแต่ปลายทศวรรษ 1970 และมีผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญเป็นทางเลือกแรกในการลดระยะเวลาการให้เคมีบำบัดของผู้ป่วยวัณโรคปอดการดื้อยา Rifampicin ส่วนใหญ่เกิดจากการกลายพันธุ์ของยีน rpoBแม้ว่ายาต้านวัณโรคชนิดใหม่จะออกมาอย่างต่อเนื่อง และประสิทธิภาพทางคลินิกของผู้ป่วยวัณโรคปอดก็ยังดีขึ้นอย่างต่อเนื่อง แต่ก็ยังขาดยาต้านวัณโรคสัมพัทธ์ และปรากฏการณ์การใช้ยาอย่างไม่มีเหตุผลในทางคลินิกก็ค่อนข้างสูงเห็นได้ชัดว่าเชื้อ Mycobacterium tuberculosis ในผู้ป่วยวัณโรคปอดไม่สามารถฆ่าได้หมดภายในเวลาอันสมควร ซึ่งในที่สุดจะนำไปสู่การดื้อยาในร่างกายของผู้ป่วยในระดับที่แตกต่างกัน ยืดอายุของโรค และเพิ่มความเสี่ยงต่อการเสียชีวิตของผู้ป่วย
ช่อง
ช่อง | แชนเนลและฟลูออโรฟอร์ | บัฟเฟอร์ปฏิกิริยา A | บัฟเฟอร์ปฏิกิริยา B | บัฟเฟอร์ปฏิกิริยา C |
ช่องแฟม | ผู้สื่อข่าว: FAM, Quencher: ไม่มี | รโปบี 507-514 | รโปบี 513-520 | 38KD และ IS6110 |
ช่อง CY5 | ผู้รายงาน: CY5, Quencher: ไม่มี | รโปบี 520-527 | รโปบี 527-533 | / |
ช่อง HEX (VIC) | ผู้รายงาน: HEX (VIC), Quencher: ไม่มี | การควบคุมภายใน | การควบคุมภายใน | การควบคุมภายใน |
พารามิเตอร์ทางเทคนิค
พื้นที่จัดเก็บ | ≤-18 ℃ ในที่มืด |
อายุการเก็บรักษา | 12 เดือน |
ประเภทชิ้นงาน | เสมหะ |
CV | ≤5.0% |
LoD | มัยโคแบคทีเรียม วัณโรค 50 แบคทีเรีย/มล ชนิดไวด์ที่ทนต่อ rifampicin: 2x103แบคทีเรีย/มล โฮโมไซกัสกลายพันธุ์: 2x103แบคทีเรีย/มล |
ความจำเพาะ | โดยตรวจพบเชื้อมัยโคแบคทีเรียมวัณโรคในป่าและตำแหน่งการกลายพันธุ์ของยีนดื้อยาอื่นๆ เช่น katG 315G>C\A, InhA-15C> T ผลการทดสอบไม่แสดงความต้านทานต่อไรแฟมพิซิน ซึ่งหมายความว่าไม่มีปฏิกิริยาข้าม |
เครื่องมือที่ใช้บังคับ: | ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ SLAN-96P ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ BioRad CFX96 LightCycler480® ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ |
ขั้นตอนการทำงาน
หากใช้ Macro & Micro-Test General DNA/RNA Kit (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (ซึ่งสามารถใช้ได้กับ Macro & Micro-Test Automatic เครื่องสกัดกรดนิวคลีอิก (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) หรือ Macro & Micro-Test Viral DNA/RNA Column (HWTS-3022-50) โดย Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd. สำหรับการสกัด เติม 200μL ของกลุ่มควบคุมเชิงบวก กลุ่มควบคุมเชิงลบและตัวอย่างเสมหะที่ประมวลผลที่จะทดสอบตามลำดับ และเพิ่ม 10μL ของการควบคุมภายในแยกต่างหากลงในกลุ่มควบคุมเชิงบวก กลุ่มควบคุมเชิงลบและตัวอย่างเสมหะที่ประมวลผลที่จะทดสอบ และขั้นตอนต่อมาควรได้รับการดำเนินการอย่างเคร่งครัด ตามคำแนะนำในการสกัดปริมาตรตัวอย่างที่สกัดได้คือ 200μL และปริมาตรตัวชะที่แนะนำคือ 100μL