กรดนิวคลีอิกของเชื้อวัณโรคและภาวะดื้อยาไรแฟมพิซิน
ชื่อผลิตภัณฑ์
ชุดตรวจหาเชื้อวัณโรคด้วยกรดนิวคลีอิกและความต้านทานยาไรแฟมพิซิน HWTS-RT074B (กราฟแสดงการหลอมละลาย)
ใบรับรอง
CE
ระบาดวิทยา
เชื้อไมโคแบคทีเรียม ทูเบอร์คูโลซิส หรือเรียกสั้น ๆ ว่าเชื้อวัณโรค เป็นแบคทีเรียก่อโรคที่ทำให้เกิดวัณโรค ปัจจุบัน ยาต้านวัณโรคกลุ่มแรกที่ใช้กันทั่วไป ได้แก่ ไอโซไนอาซิด ริแฟมพิซิน และเฮกแซมบูโทล เป็นต้น ยาต้านวัณโรคกลุ่มที่สอง ได้แก่ ฟลูโอโรควินอล อะมิคาซิน และคานามัยซิน เป็นต้น ยาที่พัฒนาใหม่ ได้แก่ ไลเนโซลิด เบดาควิลีน และเดลาไมน์ เป็นต้น อย่างไรก็ตาม เนื่องจากการใช้ยาต้านวัณโรคอย่างไม่ถูกต้องและลักษณะโครงสร้างผนังเซลล์ของเชื้อไมโคแบคทีเรียม ทูเบอร์คูโลซิส ทำให้เชื้อดื้อยา ซึ่งเป็นความท้าทายอย่างร้ายแรงต่อการป้องกันและรักษาวัณโรค
ริแฟมพิซินถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในการรักษาผู้ป่วยวัณโรคปอดตั้งแต่ปลายทศวรรษ 1970 และได้ผลดีอย่างมาก เป็นยาทางเลือกแรกในการลดระยะเวลาการรักษาด้วยเคมีบำบัดของผู้ป่วยวัณโรคปอด การดื้อยาริแฟมพิซินส่วนใหญ่เกิดจากการกลายพันธุ์ของยีน rpoB แม้ว่าจะมีตัวยาต้านวัณโรคตัวใหม่ๆ ออกมาอย่างต่อเนื่อง และประสิทธิภาพในการรักษาผู้ป่วยวัณโรคปอดก็ดีขึ้นเรื่อยๆ แต่ก็ยังขาดแคลนยาต้านวัณโรคอยู่ และปรากฏการณ์การใช้ยาอย่างไม่เหมาะสมในทางคลินิกก็ค่อนข้างสูง เห็นได้ชัดว่าเชื้อวัณโรคในผู้ป่วยวัณโรคปอดไม่สามารถถูกกำจัดได้อย่างสมบูรณ์ในเวลาที่เหมาะสม ซึ่งในที่สุดจะนำไปสู่การดื้อยาในระดับต่างๆ ในร่างกายของผู้ป่วย ยืดระยะเวลาของโรค และเพิ่มความเสี่ยงต่อการเสียชีวิตของผู้ป่วย
ช่อง
| ช่อง | ช่องสัญญาณและฟลูออโรฟอร์ | บัฟเฟอร์ปฏิกิริยา A | บัฟเฟอร์ปฏิกิริยา B | บัฟเฟอร์ปฏิกิริยา C |
| ช่อง FAM | ผู้สื่อข่าว: FAM, เครื่องดื่มดับกระหาย: ไม่มี | rpoB 507-514 | rpoB 513-520 | 38KD และ IS6110 |
| ช่อง CY5 | ผู้รายงาน: CY5, ผู้จัดหาเครื่องดื่ม: ไม่มี | rpoB 520-527 | rpoB 527-533 | / |
| ช่อง HEX (VIC) | ผู้รายงาน: HEX (VIC), ผู้จัดหาเครื่องดื่ม: ไม่มี | การควบคุมภายใน | การควบคุมภายใน | การควบคุมภายใน |
พารามิเตอร์ทางเทคนิค
| พื้นที่จัดเก็บ | อุณหภูมิ ≤-18℃ ในที่มืด |
| อายุการเก็บรักษา | 12 เดือน |
| ประเภทตัวอย่าง | เสมหะ |
| CV | ≤5.0% |
| ระดับ LoD | เชื้อวัณโรคไมโคแบคทีเรียม 50 แบคทีเรีย/มล. สายพันธุ์ป่าที่ดื้อต่อริแฟมพิซิน: 2x103แบคทีเรีย/มล. โฮโมไซกัสกลายพันธุ์: 2x103แบคทีเรีย/มล. |
| ความจำเพาะ | ชุดทดสอบนี้ตรวจจับเชื้อวัณโรคสายพันธุ์ปกติ (wild-type Mycobacterium tuberculosis) และตำแหน่งการกลายพันธุ์ของยีนต้านทานยาชนิดอื่น เช่น katG 315G>C\A, InhA-15C>T ผลการทดสอบแสดงว่าไม่มีการดื้อต่อยาไรแฟมพิซิน ซึ่งหมายความว่าไม่มีปฏิกิริยาข้ามสายพันธุ์ |
| เครื่องมือที่เกี่ยวข้อง: | ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ SLAN-96P ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ BioRad CFX96 ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ LightCycler480® |
ขั้นตอนการทำงาน

หากใช้ชุดสกัด DNA/RNA ทั่วไปของ Macro & Micro-Test (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (ซึ่งสามารถใช้ร่วมกับเครื่องสกัดกรดนิวคลีอิกอัตโนมัติของ Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) หรือคอลัมน์สกัด DNA/RNA ของไวรัสของ Macro & Micro-Test (HWTS-3022-50) จาก Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd. ในการสกัด ให้เติมสารควบคุมเชิงบวก สารควบคุมเชิงลบ และตัวอย่างเสมหะที่ผ่านการประมวลผลที่จะทดสอบตามลำดับ ปริมาณ 200 μL และเติมสารควบคุมภายใน ปริมาณ 10 μL ลงในสารควบคุมเชิงบวก สารควบคุมเชิงลบ และตัวอย่างเสมหะที่ผ่านการประมวลผลที่จะทดสอบแยกกัน จากนั้นให้ดำเนินการขั้นตอนต่อไปอย่างเคร่งครัดตามคำแนะนำในการสกัด ปริมาณตัวอย่างที่สกัดได้คือ 200 ไมโครลิตร และปริมาณการชะล้างที่แนะนำคือ 100 ไมโครลิตร








